實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：肌酸激酶(CK)測試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號：BK-01S6364

產(chǎn)品分類：輔酶Ⅱ系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

10L Tricine-SDS-PAGE陰極電泳液（干粉） Tricine SDS-PAGE Anode Buffer 常溫保存

2 ug pYES3 pYES3 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50次 柱式水樣DNAout Column Water DNAOUT 常溫

2 ug pET-23(+)-TEV pET-23(+)-TEV 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

LEB肉湯 Listeria Enrichment Broth 250g

1瓶 3T3細(xì)胞株 3T3 低溫運(yùn)輸和保存

1個(gè) 陶瓷研缽 （直徑75 mm）  常溫

50 T 微量丙二醛測試盒/脂質(zhì)過氧化物測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH5.0  MES Buffer,1.0M,pH5.0  常溫保存

100次 哺乳動物種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因） Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMAL- c2x pMAL- c2x 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

肌酸激酶(CK)測試盒紫外分光光度法DCAKD  脫磷酸輔Ａ結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Bovine IgG/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

Squalene Epoxidase  鯊烯環(huán)氧抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZSWIM2  E3泛素蛋白連接ZSWIM2抗體 規(guī)格: 0.2ml

CKS2  細(xì)胞周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Endomucin  內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 0.2ml

GDF10  生分化因子10抗體（TGF-β超家族10） 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

CCL4/MIP-1 Beta  巨噬細(xì)胞性蛋白1β抗體 規(guī)格: 0.1ml

C20orf103  20號染色體開放閱讀框103抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Bad(Ser112)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

UNC93B  內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體 規(guī)格: 0.2ml